Методы диагностики наследственных болезней липидов

Методы диагностики наследственных болезней липидов:
• Для определения липидов и липопротеидов сыворотки крови широко используется метод хроматографии (методы тонкослойной или газожидкостной хроматографии). С помощью этих методов возможно определение фосфолипидов, холестерина и его эфиров, моно- и триглицеридов, свободных жирных кислот.
На основе тонкослойной хроматографии возможно разделение фосфолипидов. Метод газожидкостной хроматографии позволяет определить количество неэстерифицированныхжирных кислот (НЭЖК) в сыворотке крови.

Методы определения концентрации холестерина в крови многочисленны, но в их основе лежит использование уксусного ангидрида или уксусной кислоты или хлорида железа. Так, метод Илька основан на цветной реакции Либермана-Бурхардта.
Холестерин при взаимодействии с добавленными уксусным ангидридом, уксусной кислотой и концентрированной серной кислотой дает ярко-зеленое окрашивание, по степени которого определяется концентрация холестерина. Для исследования достаточно 0,1 мл сыворотки крови (без гемолиза).

Определение содержания триглицеридов в плазме осуществляется с использованием трех методов: 1) ферментного, 2) калориметрического, основанного на окислении глицерина до формальльдегида и 3) флюорометрического, основанного на определении формальльдегида.

• Количественное определение липопротеидов проводится также с помощью электрофореза и ультрацентрифугирования.

Следует придавать значение визуальной оценке плазмы. При высокой концентрации хиломикронорв и пре-3-липопротеидов плазма приобретает мутный оттенок и становится молочной.

Для выделения фракций липопротеидов используются различные виды электрофореза (на бумаге, ацетилцеллюлозе, полиакриламидном геле и других носителях). Липопротеиды, разделенные путем электрофореза, можно определять количественно (путем денситометрии липопротеидограмм или элюирования каждой фракции с последующим фотометрическим или химическим определением их содержания).
Так называемые «флотирующие липопротеиды» определяют путем комбинирования метода электрофореза в полиакриламидном геле и электрофореза на других носителях (бумага, агар, ацетилцеллюлоза).

Метод ультрацентрифугирования (по Hafen, Less) позволяет на основе различной плотности липопротеидов, которая определяется соотношением их белковых и липидных компонентов, проводить их фракционирование. Могут использоваться различные виды центрифугирования - препаративное, аналитическое и др.
В результате липопротеиды разделяются на липопротеиды низкой, очень низкой и высокой плотности и определяется их количественное содержание путем сравнения с известными стандартными концентрациями.

Используются и более простые методы определения липопротеидов:
• методы осаждения, основанные на образовании нерастворимых комплексов определенных классов липопротеидов при добавлении гепарина, амилопектинсульфата, декстрансульфата или поливинилпирролидона;
• методы нефелометрии, основанные на оценке различной интенсивности рассеяния света при различных концентрациях липопротеидов в плазме, что позволяет определять содержание хиломикронов, пре-b-липопротеидов;
• иммунохимические методы (на основе принципа иммунопреципитации), которые позволяют определить содержание липопротеидов и общую концентрацию пре-b-липопротеидов, b-липопротеидов и хиломикронов в плазме крови.

Липопротеиды и холестерин крови в норме

Липопротеиды и холестерин крови в норме

- Рекомендуем далее ознакомиться со статьей "Методы диагностики наследственных болезней соединительной ткани"

Оглавление темы "Скрининг наследственных и врожденных заболеваний":
  1. Методы диагностики фенилкетонурии - проявления
  2. Методы диагностики гиперфенилаланинемии (ГФА) - проявления
  3. Скрининг на врожденный гипотиреоз - проявления
  4. Скрининг на муковисцидоз - проявления
  5. Скрининг на адреногенитальный синдром - проявления
  6. Скрининг на галактоземию - проявления
  7. Скрининг на гомоцистинурию - проявления
  8. Методы диагностики наследственных болезней липидов
  9. Методы диагностики наследственных болезней соединительной ткани
  10. Методы диагностики наследственных рахитоподобных заболеваний

Ждем ваших вопросов и рекомендаций: