Верифицирующая (подтверждающая) биохимическая диагностика имеет целью подтвердить или отвергнуть диагноз у лиц с клиническими симптомами болезней или у лиц, подозрительных на наследственные болезни, выявленных при массовом или селективном скрининге. Для верификации наследственной патологии применяются соответствующие методы и лабораторная аппаратура.

Для диагностики могут использоваться различные биологические материалы (кровь, сыворотка крови, плазма, моча, пот, спинномозговая жидкость), культура клеток (фибробласты, лимфоциты, гепатоциты).

А. Сыворотка (плазма) крови
Сыворотка (плазма) крови используется для следующих целей:
1. Определение аминокислот в сыворотке крови или плазме методом жидкостной хроматографии высокого разрешения помогает исключить нарушения обмена.
2. Определение ацилкарнитина методом хроматографии с масс-спектрометрией используется для диагностики дефектов обмена жирных кислот и нарушений метаболизма органических кислот. Для исследования берется кровь, взятая на фильтровальную бумагу, или плазма.
3. Исследование содержания лактата и пирувата в плазме дает возможность диагностики митохондриальных болезней.
4. Определение уровня жирных кислот с очень длинной углеродной цепью, фитановой и пипеколовой кислот в сыворотке крови и плазмалогенов в эритроцитах с помощью метотдов хроматографии с масс-спектрометрией или с помощью метода тандемной масс-спектрометрии позволяет верифицировать нарушения обмена пероксисом.
5. Методом электрофореза выявляются дефекты обмена гемоглобина (гемоглобинопатии).

Б. Биохимические исследования мочи для диагностики наследственных заболеваний
Для предварительной диагностики наследственных болезней рекомендуется обращать внимание не только на чисто технические лабораторные исследования, но и на простую визуальную оценку цвета и запаха мочи.
Наряду с клинической характеристикой состояния цвета и запаха мочи, большую роль в диагностике наследственной патологии играют результаты качественных и полуколичественных лабораторных исследований крови и мочи. Внедрение точных аналитических методов исследования различных метаболитов в биологических жидкостях организма несколько уменьшили значение качественных методов лабораторной диагностики, однако последние в ряде случаев могут оказать неоценимую помощь в ранней диагностике того или иного наследственного заболевания.
Наряду с качественными лабораторными методами диагностики наследственной патологии в медико-генетической практике нашли широкое применение количественные методы лабораторной диагностики и методы подтверждающей биохимической диагностики.

В качестве материала для полуколичественных и количественных тестов могут использоваться:
- моча (тест с цианид-нитропруссидом - для диагностики гомоцистинурии и цистинурии; ЦПХ-тест - выявления мукополисахаридов),
- кровь (определение содержания глюкозы, холестерина, триглицеридов, молочной и пировиноградной кислот, газового состава крови, аммиака и др.).

Цель этих исследований заключается в том, чтобы определить направление дальнейших исследований для подтверждения диагноза. Так, исследование уровня лактата и пирувата в крови служит первым этапом для дифференциальной диагностики митохондриальной патологии; определение равновесия кислот и оснований крови и метаболический ацидоз служат основанием для проведения хроматографического исследования и исключения органических ацидурий; обнаружение повышенного уровня аммиака в крови - для исключения дефектов в цикле обмена мочевины и т.д.

К биохимическим аналитическим тестам, которые часто служат для подтверждающей диагностики наследственных болезней и которые пока еще мало доступны для широкой педиатрической практики, относятся:
- Определение экскреции органических кислот с мочой с помощью метода газовой хроматографии и масс-спектрометрии (проводят при подозрении на наследственные нарушения аминокислот, органических кислот, обмена жирных кислот, митохондриальные болезни).
- Определение уровня оротовой кислоты (при диагностике нарушений цикла мочевины).
- Определение ацилкарнитина и ацилглицина при подозрении на дефицит карнитина, нарушение окисления жирных кислот, дефекты метаболизма органических кислот.
- Тонкослойная хроматография - чувствительный и специфический метод скрининга, направленный на выявление нарушений обмена гликозамипоглнкапов, олигосахаридов и сиаловой кислоты, аминокислот.
- Желчные кислоты определяются методом хромато-масс-спектрометрии или тандемной масс-спектрометрии при нарушениях их обмена (пероксисомные болезни).

Могут применяться методы исследования тканевых культур (нативных и культивированных) - они направлены на определение активности ферментов (флюорометрическим методом).

- Читать далее "Диагностика гетерозиготного носительства. Показания для исследования органических кислот в моче"