При патогистологическом исследовании высыпания при ветряной оспе и опоясывающем герпесе неразличимы. Присутствие многоядерных гигантских клеток и эпителиоцитов с ацидофильными внутриядерными включениями позволяет дифференцировать высыпания, вызванные вирусом ветряной оспы, от других везикулезных высыпаний (например, при натуральной оспе, инфекциях, вызванных покс-, коксаки- и эховирусами), за исключением инфекций ВПГ.

Забор материала для мазка по Тцанку производится со дна свежего пузырька, наносится на предметное стекло, закрепляется ацетоном или метанолом и затем окрашивается гематоксилин-эозином, по Гимзе, Папаниколау или методом Paragon на замороженных срезах.

Биопсия кожи с последующим гистологическим исследованием является более надежным методом диагностики по сравнению с исследованием по Тцанку и позволяет поставить диагноз еще до появления пузырьков, а также в атипичных случаях, таких как веррукозные высыпания у пациентов со СПИДом, инфицированных резистентным к ацикловиру вирусом.

В целях диагностики используется метод выделения вируса в культуре клеток из содержимого пузырьков, крови, цереброспинальной жидкости и инфицированных тканей, а также прямое определение антигенов и нуклеиновых кислот вируса в вышеперечисленных материалах. Только после выделения вируса с помощью культурального метода возможно определение чувствительности к противовирусным препаратам, однако вирус чрезвычайно нестабилен, и положительные результаты получают лишь в 30-60% подтвержденных случаях инфекции. Для повышения эффективности данного метода диагностики необходимо проводить исследование сразу же после забора материала, а также проводить забор из свежих пузырьков с прозрачной жидкостью, поскольку вероятность выделения вируса снижается по мере превращения элементов в пустулы, а на стадии корочек вирус практически никогда не выделяется.

Вирус может быть изолирован и копирован in vitro в однослойных культурах различных клеток человека и некоторых обезьян. Цитопатический эффект, вызванный репликацией вируса в таких культурах клеток, проявляется в формировании ацидофильных внутриядерных включений и многоядерных гигантских клеток, похожих на те, которые выделяются при инфекции в кожных элементах.

В случае выделения in vitro, несмотря на быстрое распространение вируса в соседние клетки, цитопатический эффект наблюдается лишь в центральной части клеточной культуры. Цитопатический эффект развивается спустя несколько дней после заражения клеток. Существуют модификации культурального метода, когда жидкость из пузырьков или материал из соскоба с очагов поражения центрифугируются на клетки, растущие на покровном стекле на дне тонкостенной стеклянной ампулы, а через 24-72 часа фиксируются и окрашиваются флюоресцирующими или инзим-содержащими мононуклеарными антителами к белкам вируса.

Данный метод позволяет достаточно быстро осуществлять диагностику и раньше определять цитопатический эффект, который при рутинной культуральной диагностике развивается в более поздние сроки.

Методом выбора являются иммунофлюоресцентный и иммунопероксидазный анализы клеточного материала из свежих пузырьков или превезикулезных высыпаний. С их помощью удается определять вирус в более короткие сроки и в большем проценте случаев, даже когда результаты культуральной диагностики отрицательные. Другим высокочувствительным и быстрым методом определения вирусных антигенов является иммуноферментный анализ.

Современный метод определения ДНК вируса с помощью ПЦР-реакции, обладает высокой чувствительностью, специфичностью и быстротой исполнения. Он кардинально усовершенствовал диагностику VZV-инфекций и способен дифференцировать штаммы дикого типа и Ока-вакцины у вирусов VZV и ВПГ.

Серологические методы используются для ретроспективной диагностики ветряной оспы и опоясывающего герпеса (сравниваются сыворотки больного в острую стадию заболевания и в период реконвалесценции), а также в целях определения лиц, требующих изоляции или профилактического лечения. Чаще всего используется твердофазный ферментный иммуносорбентный анализ (ТИФА), который, однако, обладает недостаточной чувствительностью и специфичностью и в некоторых случаях дает ложноположительнные результаты. В последнее время разработаны новые методы диагностики, такие как иммуноферментный анализ для определения антител к вирус-индуцированным мембранным антигенам (флюоресцирующие антитела к мембранным антигенам), позволяющие достоверно дифференцировать иммунизированных и восприимчивых лиц, а также тест латекс-агглютинации, который по своей чувствительности и специфичности сравним с предыдущим методом, однако более прост в исполнении.

- Рекомендуем далее ознакомиться со статьей "Осложнения ветряной оспы и опоясывающего лишая"

Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 12.5.2019