Гибридные клетки. Цитогибриды

Гибридные клетки, полученные путем слияния ЭСК с соматическими клетками, представляют собой адекватную и перспективную модель для изучения плюрипотентности стволовых клеток и репрограммирования хромосом дифференцированных клеток (Серов и др., 2001).

Цитогибриды, полученные методом слияния ЭСК с дифференцированными клетками взрослого животного, дают возможность изучать взаимоотношения геномов разного "возраста": складывается уникальная ситуация, когда гомологичные хромосомы, происходящие из клеток разных стадий дифференцировки и разной степени зрелости, находятся в одном ядре, где они могут легко обмениваться трансдействующими регуляторными сигналами.

Трудно предвидеть, как будут реагировать цисрегуляторные эпигенетические системы гомологичных хромосом, сложившиеся в ходе индивидуального развития, в ответ на влияние трансдеиствующих сигналов, исходящих от эмбриональных родственных геномов. Кроме того, в гибридных клетках происходит сегрегация родительских хромосом, что позволяет изучать взаимодействие геномов на уровне отдельных хромосом, то есть, потенциально идентифицировать участие конкретных хромосом в поддержании плюрипотентности или, наоборот, выхода в дифференцировку (Серов и др., 2001).

В качестве первой экспериментальной модели для изучения взаимодействия геномов с разной "историей развития" использовались цитогибриды, полученные при слиянии плюрипотентных тератокарциномных и дифференцированных соматических клеток (Papaioannou, Rossant, 1983; Дыбан П., 1988).

цитогибриды

В некоторых случаях такие гибридные клетки сохраняли плюрипотентные свойства на достаточно высоком уровне. В частности, in vivo тератокарциномно-соматические гибридные клетки индуцировали развитие истинных тератом, содержащих дериваты всех трех зародышевых листков (Andrews, Goodfellow, 1980; Atsumi et al., 1982; Rousset et al., 1983; Takagi et al., 1983), a in vitro в суспензионных культурах формировали эмбриоидные тельца (Takagi, 1993).

Даже у межвидовых цитогибридов такого типа отмечалось наличие эмбриональных антигенов в тех случаях, когда соматическими партнерами в слиянии с клетками тератокарциномы были лимфоциты или тимоциты (Forejt et al, 1984; Serov et al., 1990). Примечательно, что цитогибриды, созданные при слиянии тератокарциномных клеток с фибробластами, по фенотипу соответствовали фибробластам (Rousset et al., 1979).

Наиболее важным установленным фактом является то, что в тератокарциномно-соматических гибридных клетках появлялись признаки репрограммирования генома дифференцированных клеток, что характеризовалось реактивацией либо отдельных генов (Miller, Ruddle, 1976, 1977; Andrews, Goodfellow, 1980; Artzt et al., 1980; Rousset et al., 1983), либо неактивной Х-хромосомы соматического партнера (Takagi et al., 1983; Takagi, 1988; Mise et al., 1996).

Таким образом, результаты исследований на цитогибридах типа тератокарциномно-соматических клеток свидетельствуют о том, что в гибридных клетках нередко сохраняется плюрипотентность и имеются признаки репрограммирования генома соматического партнера.

- Читать далее "Видовые эмбриональные гибридные клетки. Получение клонов гибридных клеток"

Оглавление темы "Дифференциация эмбриональных стволовых клеток":
1. Культивирование эмбриональных стволовых клеток. Участие стволовых клеток в эмбриогенезе
2. Генетически модифицированные стволовые клетки. Участие генов в дифференциации стволовых клеток
3. Гибридные клетки. Цитогибриды
4. Видовые эмбриональные гибридные клетки. Получение клонов гибридных клеток
5. Хромосомный и генетический набор гибридных клеток. Плюрипотентность гибридных клеток
6. Репрограммирование Х-хромосомы гибридных клеток. Плюрипотентность цитогибридов
7. Хромосомная память. Эффективная экспансия стволовых клеток в культуре
8. Спонтанная дифференцировка эмбриональных стволовых клеток. Дифференцировка стволовых клеток
9. Индуцированная дифференциация стволовых клеток. Направленная дифференциация стволовых клеток
10. Селективная дифференциация стволовых клеток. Регуляция дифференцировки стволовых клеток