а) Терминология:

1. Фиксация:
- Воздействие на белки ткани таким образом, чтобы сделать ткань устойчивой к дальнейшим изменениям

2. Обработка:
- Процесс подготовки ткани для изготовления микроскопических срезов:
• Обезвоживание, очистка, пропитывание ткани парафином, заливка, приготовление срезов ткани для микропрепаратов

3. Гистохимическое окрашивание:
- Использование химических реакций для выделения или дифференцировки различных компонентов в препарате

б) Окрашивание ядер и цитоплазмы:

1. Гематоксилин и эозин:
- Рутинное окрашивание, наиболее часто используемое при исследовании тканей:
• Окрашивает ядра в синий/фиолетовый цвет
• Окрашивает цитоплазму в розовый цвет

2. Окраска по Фельгену:
- Окрашивает ядерную ДНК в красновато-фиолетовый цвет

3. Метиловый зеленый — пиронин Y:
- Позволяет дифференцировать ДНК и РНК
• Окрашивает ядерную ДНК в цвета от синего до зеленого
• Окрашивает цитоплазматическую РНК в цвета от розового до розово-красного
- Используется для обнаружения плазматических клеток и иммунобластов

4. По Романовскому:
- Включает в себя несколько различных модификаций окрашивания:
• По Райту
• По Гимзе
• Другие
- Позволяет дифференцировать гемопоэтические клетки по особенностям их окрашивания

в) Окрашивание углеводов:

1. Реактив Шиффа (ШИК-реакция или PAS-реакция):
- Идентифицирует полисахариды, нейтральные муцины, базальные мембраны:
• Ярко-розовое окрашивание

2. ШИК-реакция с диастазой:
- Может использоваться для демонстрации гликогена:
• Ярко-розовое окрашивание
- Диастаза ферментирует гликоген, обусловливая исчезновение окрашивания

3. Муцикармин:
- Идентифицирует кислые муцины (обычно в эпителии):
• Ярко-розовое окрашивание
- Обычно добавляется желтое контрастирующее окрашивание

4. Альциановый синий (pH 2,5):
- Идентифицирует кислые мукополисахариды, включая сульфатированные и карбоксилированные кислые мукополисахариды, а также сульфатированные и карбоксилированные сиаломуцины:
• Окрашивание от ярко-синего до сине-зеленого

5. Альциановый синий (pH 1,0):
- Идентифицирует сульфатированные муцины
• Окрашивание от ярко-синего до сине-зеленого

6. Альциановый синий с гиалуронидазой:
- Дифференцирует муцины эпителия и соединительной ткани:
• Соединительная ткань богата гиалуроновой кислотой
- Кислые мукополисахариды и сиаломуцины окрашиваются в темно-синий цвет
- Вещества, содержащие гиалуроновую кислоту и хондроитинсульфаты А и С, теряют окрашивание при обработке гиалуронидазой

7. Альциановый синий с реактивом Шиффа:
- Позволяет различать нейтральные и кислые муцины:
• Кислые слизистые субстанции окрашиваются в синий цвет
• Нейтральные полисахариды окрашиваются в пурпурный цвет

8. Коллоидное железо:
- Идентифицирует карбоксилированные и сульфатированные мукополисахариды и гликопротеины
• Окрашивает их в темно-синий цвет

г) Методы окрашивания соединительной ткани:

1. Трихромовый метод по Массону:
- Позволяет дифференцировать коллаген/соединительную ткань и мышцы:
• Коллаген и соединительная ткань окрашиваются в цвета от синего до сине-зеленого
• Мышцы окрашиваются в красный цвет
- Также окрашивает ядра клеток в черный цвет

2. Окрашивание на эластин:
- Выявляет эластические волокна:
• Окрашивает их в черный или темно-фиолетовый цвет в зависимости от способа окрашивания
• Содержатся в соединительных тканях, коже, легких/ плевре, артериях, венах, эластических хрящах

4. Пентахромная окраска по Мовату:
- Выявляет 5 типов тканей:
• Коллаген окрашивается в желтый цвет
• Мышцы окрашиваются в красный цвет
• Эластические волокна окрашиваются в черный цвет
• Муцины окрашиваются в синий цвет
• Фибрин окрашивается в интенсивно красный цвет
- Обычно используется при окраске соединительных тканей, сердца, кровеносных сосудов

5. Окрашивание ретикулиновых волокон:
- Выявляет ретикулиновые волокна:
• Окрашивает их в черный цвет
• Выявляются в соединительных тканях печени, костного мозга, лимфоретикулярных органах

д) Методы окрашивания мышц:

1. Фосфорно-вольфрамовая кислота и гематоксилин:
- Выявляет поперечную исчерченность мышц, фибрин и глиальные волокна:
• Голубое окрашивание
- Также окрашивает эластические волокна в фиолетовый цвет, а соединительную ткань — в цвет от оранжево-розового до коричнево-красного

е) Методы окрашивания жировой ткани:

1. Масляный красный О [Oil Red О в значительной степени заменил Sudan III и Sudan IV, поскольку он обеспечивает более глубокий красный цвет]:
- Выявляет нейтральные липиды:
• Красное окрашивание
- Используется на криостатных срезах

2. Судан черный В:
- Выявляет нейтральные липиды:
• Черное окрашивание
- Используется на срезах замороженных тканей

ж) Методы окрашивания нервов:

1. Нитрат серебра:
- Выявляет нервные волокна и нейрофибриллы:
• Окрашивает в черный цвет

2. Фосфорно-вольфрамовая кислота и гематоксилин по Мэллори:
- Выявляет глиальные нити, нейроны и миелин:
• Глиальные нити окрашиваются в синий цвет
• Нейроны окрашиваются в оранжево-розовый цвет
• Миелин окрашивается в синий цвет

3. По Кахалю:
- Выявляет астроциты:
• Черное окрашивание

4. По Вейлю:
- Выявляет миелин:
• Синее/черное окрашивание

5. Люксол быстрый голубой:
- Выявляет миелин:
• Синее окрашивание
- Также окрашивает нейропиль в розовый цвет

з) Пигменты, минералы и гранулы:

1. Берлинская лазурь:
- Выявляет трехвалентное железо (гемосидерин):
• Синее окрашивание

2. По Массону—Фонтана:
- Выявляет меланин:
• Черное окрашивание

3. По фон Коссу:
- Выявляет кальций и кальцифицированные структуры:
• Черное окрашивание

4. Роданин:
- Выявляет медь:
• Ржаво-коричневое окрашивание

и) Другие методы окрашивания:

1. Толуидиновый синий:
- Выявляет тучные клетки:
• Темно-фиолетовое окрашивание [Гликозаминогликанов и гранул тучных клеток]

2. Метенамином серебра по Джонсу:
- Выявляет базальные мембраны почечных клубочков:
• Черное окрашивание
- Сочетание метенамина серебра и реактива Шиффа

- Читать "Иммуногистохимическое исследование нормальных тканей - с точки зрения гистологии"

Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 8.9.2023