В настоящее время промышленность перешла на выпуск высоко-очищенного препарата АКТГ (оксицель). Рассмотрим технологическую схему производства АКТГ и гормона роста (СТГ).

1. Получение сырца АКТГ — СТГ. 1 кг сухого порошка лиофилизованных или высушенных ацетоном гипофизов экстрагируют 2,5 л ацетона, 16 л ледяной уксусной кислоты и 50 мл воды. Смесь перемешивают и нагревают до 70° С; экстракция продолжается 1,5 ч.
После охлаждения до 40° С смесь пропускают через нутч-фильтр. Осадок на фильтре промывают 2 л ледяной уксусной кислоты и 2 л ацетона. В объединенном фильтрате отделяют балластные белки; для этого при перемешивании добавляют 0,1 л 5 н. хлористого натрия, 10—11 л ацетона. Формирование осадка при 5—6° С производят в течение нескольких часов, после чего его отделяют на нутч-фильтре и промывают раствором, содержащим 2 л ледяной уксусной кислоты, 2 л ацетона, 20 мл-Ъ н. хлористого натрия. В объединенные фильтраты при 5—6° С добавляют равный объем эфира. Сформировавшийся осадок отделяют на фильтре, промывают 4—5 л ацетона, 0,25—0,4 л эфира и досушивают на воздухе, а затем в вакуум-эксикаторе.

Осадок содержит сырец АКТГ — СТГ. Выход — 150—180 г, активность АКТГ'— 1—4 ЕД, содержание СТГ — 10%.

2. Разделение АКТГ и СТГ. Оксицеллюлозу, содержащую карбоксильные группы (9—12%), разрыхляют, дважды промывают бидистиллятом, 1 л соляной кислоты (1—1,5 л на 100 г), затем дистиллированной и бидистиллированной водой до удаления иона хлора (проба с AgNO3) и 0,1н. уксусной кислотой.
100 г сырого сырца растворяют в 4 л 0,1 н уксусной кислоты, нерастворившуюся часть отделяют центрифугированием. В прозрачный раствор сырца АКТГ — СТГ добавляют 20% (по весу) оксицеллюлозы. Адсорбцию при комнатной температуре и встряхивании на шюттель-аппарате проводят 16 ч, после чего оксицеллюлозу отделяют через шелковое сито и элюируют, как описано ниже.

В фильтрат добавляют 50% оксицеллюлозы для вторичной адсорбции АКТГ в тех же условиях.
Для элюирования обе порции оксицеллюлозы после промывки 0,1н уксусной кислотой заливают 0,1н. соляной кислотой до общего объема 1000 мл. Элюирование при встряхивании и комнатной температуре проводят 12 ч.

Элюат фильтруют через стеклянную воронку с пористым фильтром. Оксицеллюлозу на фильтре промывают небольшими порциями 0,1н. соляной , кислоты до отрицательной биуретовой реакции. Элюат и промывные воды смешивают с небольшим количеством ЭДЭ-10 с таким расчетом, чтобы рН элюата повысился до 3. Раствор фильтруют и лиофилизируют.

3. Получение СТГ. К 4 л сорбированного раствора при перемешивании добавляют 15—20% раствор едкого кали или едкого натра до 0,3н. концен-трации щелочи и затем при помешивании добавляют ледяную уксусную кислоту, проходя зону образования стойкого помутнения при рН = 10 и заканчивая добавление кислоты при рН = 8,5 -~ 8,6. Перемешивание продолжают еще 30 мин.
Образовавшийся осадок отделяется центрифугированием. Центрифугат передают на лиофилизацию СТГ.

АКТГ-цинк-фосфат.

Это препарат АКТГ с удлиненным действием.
Технологическая схема производства. Производство АКТГ-цинк-фосфата слагается из отдельных стадий.

Дополнительная очистка порошка АКТГ. Производится до достижения активности 4 ЕДв 1 мл.
Приготовление двух отдельных растворов, отпускаемых в склянках и в ампулах. Склянка содержит 4 мл раствора АКТГ (100 ЕД) в 0,01 н. соляной кислоте, 0,3% фенола, 0,9% хлорида натрия и до 0,2% хлорида цинка.

Раствор (рН = 2,8-3,0) пропускают через бактериальный фильтр и асептически разливают в склянки емкостью по 5 мл, которые сразу закупоривают резиновыми пробками с металлической обкаткой.
В ампулы разливают 2% раствор фосфата натрия (двухзамещенного) к которому добавляют 2 н. раствор едкого натра до рН = 10,5-т- 11,5. Раствор в запаянных ампулах должен быть стерильным.

Хранение. Срок хранения склянок с АКТГ-цинк-раствором и ампул фосфатного буфера — четыре месяца со дня изготовления.

- Читать далее "Питуитрин сухой. Питуитрин для инъекций."