Полисахариды, олигосахариды и липиды клеток и тканей

Полисахариды в организме встречаются либо в свободном состоянии либо в соединении с белками и липидами. В комбинированном состоянии они образуют чрезвычайно сложную гетерогенную группу. Полисахариды можно выявить ШИК-реакцией, или PAS-реакцией (Шифф-йодной кислотой, иными словами, реакцией с перйодатом — реактивом Шиффа; англ. название —periodicacid-Schiff— PAS). Она основана на превращении 1,2-гликольных групп, имеющихся в молекулах Сахаров, в альдегиды.

Эти альдегиды далее выявляют реактивом Шиффа, дающим пурпурное или красное окрашивание в участках среза, содержащих скопления полисахаридов.

В организме повсеместно распространен свободный полисахарид гликоген, который можно выявить ШИК-реакцией в печени, поперечнополосатой мышце и других тканях, где имеются его скопления.

Гликопротеины представляют собой молекулы белка, связанного с мелкими разветвленными цепочками углеводов (олигосахаридов). Белковая цепочка преобладает по массе и объему над олигосахаридной. Поскольку как гликоген, так и нейтральные гликопротеины дают ШИК-реакцию, специфичность ШИК-реакции можно повысить путем сравнения окраски обычных срезов с окраской срезов, предварительно обработанных ферментом, расщепляющим гликоген (например, амилазой, содержащейся в слюне).
Структуры, которые интенсивно окрашиваются при проведении ШИК-реакции, но не окрашиваются после воздействия амилазы, содержат гликоген.

Гликозаминогликаны — высокоанионные, неразветвленные длинноцепочечные полисахариды, содержащие аминированные моносахариды (аминосахара). В результате прикрепления цепочек гликозаминогликанов к белковой основе образуются сложные молекулы — протеогликаны.

К последним относятся некоторые из очень важных компонентов межклеточного вещества (матрикса) соединительной ткани. В отличие от гликопротеинов, углеводные цепочки в протеогликанах представляют собой главный компонент их молекулы.

Гликозаминогликаны и кислые гликопротеины обладают резко выраженными анионными свойствами вследствие высокого содержания в них карбоксильных и сульфатных групп. По этой причине они дают сильную реакцию с красителем альциановым синим.

полисахариды
Кишечная ворсинка, окрашенная с помощью ШИК-реакции.
Окраска интенсивна вобласти щеточной каемки клеточной поверхности (стрелки) и в секреторном продукте бокаловидных клеток (Б) вследствие высокого содержания полисахаридов.
Докраска гематоксилином. Большое увеличение.

Липиды клеток и тканей

Липиды наилучшим образом выявляются жирорастворимыми красителями. Замороженные срезы погружают в спиртовые растворы, насыщенные красителем. К наиболее часто используемым красителям относятся судан IV и судан черный. Краситель растворяется в клеточных липидных капельках, которые окрашиваются в красный или черный цвет.

Дополнительные методы, используемые для выявления локализации холестерола и его эфиров, фосфолипидов и гликолипидов, полезны для диагностики метаболических заболеваний, которые сопровождаются внутриклеточным накоплением различных видов липидов.

- Читать далее "Иммуноцитохимия: поликлональные и моноклональные антитела"

Оглавление темы "Методы гистологии":
  1. Трансмиссионная электронная микроскопия: методика, принципы
  2. Сканирующая электронная микроскопия: методика, принципы
  3. Авторадиография срезов тканей: методика, принципы
  4. Культура клеток и тканей. Применение
  5. Фракционирование клеток. Гистохимия, цитохимия
  6. Полисахариды, олигосахариды и липиды клеток и тканей
  7. Иммуноцитохимия: поликлональные и моноклональные антитела
  8. Метод гибридизации в иммуноцитохимии: методика, принципы
  9. Трудности исследования срезов тканей. Причины проблем
  10. Разновидности клеток организма. Классификация

Ваши замечания и вопросы: