ЭКО. Традиционное оплодотворение
ЭКО — процедура, при которой у бесплодной пары берут яйцеклетки и сперму, смешивают их, что приводит к образованию зиготы в лабораторных условиях. Цель ЭКО — получение эмбрионов, а затем достижение беременности и рождение здорового ребенка. Сперматозоиды забирают с помощью методов, описанных выше.
Если есть достаточное количество сперматозоидов приемлемого качества, можно попытаться осуществить ЭКО с традиционной инсеминацией. Однако понятия «достаточное качество и количество» в действительности субъективны; в каждой лаборатории существуют собственные критерии, чтобы определить, когда для достижения оплодотворения паре следует использовать традиционную инсеминацию, а в каких случаях лучше подойдет интрацитоплазиматическая инъекция сперматозоида (ИЦИС).
Существуют многочисленные способы и комбинации методов обработки сперматозоидов. Первичная цель — удаление семенной жидкости и отделение подвижных сперматозоидов с нормальной морфологией и по возможности минимальным содержанием чужеродных клеточных примесей. Используют следующие процедуры: промывание спермы, разделение по градиенту плотности, метод «всплывания».
Независимо от метода обработки спермы рекомендуют поместить сперматозоиды приблизительно на 4 ч в культуральную среду с добавлением протеинов в инкубатор с углекислым газом для обеспечения жизнеспособности сперматозоидов.

Жизнеспособность определяют как способность сперматозоидов связываться с вителлиновым слоем ооцита, проникать в вителлиновый слой и оволемму и в итоге оплодотворять яйцеклетку. Непосредственно перед оплодотворением образец спермы следует протестировать на концентрацию и подвижность сперматозоидов. Используя эти значения, можно рассчитать необходимый для оплодотворения объем среды, содержащей сперматозоиды в количестве, достаточном для оплодотворения.
Обычно ооциты оплодотворяют через 3-6 ч после забора, рассчитывая время инкубации с учетом их степени зрелости. Ооциты можно оплодотворять по отдельности или в группах. Группы ооцитов можно инкубировать и оплодотворять в чашках Петри или тестовых канюлях, содержащих сбалансированную среду с масляным покрытием или без него.
Отдельные яйцеклетки также можно оплодотворять в сосудах с 30-50 мкл капель сбалансированной культурной среды с масляным покрытием. Таким образом снижают требуемое для оплодотворения количество сперматозоидов. Итоговая концентрация подвижных сперматозоидов, используемая для традиционного оплодотворения, варьирует в разных лабораториях, в зависимости от клинической практики.
Слишком высокая концентрация может привести к увеличению доли случаев полиагурмии (когда более одного сперматозоида проникает в ооцит).
Слишком низкая концентрация может снизить показатели оплодотворений. Обычно концентрация варьирует от 50 000 до 100 000 подвижных сперматозоидов в 1 мл. Другие цифры отмечают при субоптимальных параметрах подвижности или морфологии.
- Рекомендуем далее ознакомиться со статьей "Интрацитоплазматическая инъекция сперматозоидов (ИЦИС). Методика"
Оглавление темы "Анализ спермы, ооцитов":- Хирургический забор спермы. Микрохирургическая эпидидимальная аспирация спермы (MECA)
- Тестикулярный забор-аспирация спермы (ТЕСА). Микроскопический тестикулярный забор спермы (микроТЕСА)
- Консервация сперматозоидов. Обработка ооцитов при ЭКО
- Забор яйцеклетки при ЭКО. Оценка состояния ооцита
- Созревание ооцитов in vitro при ЭКО. Гормоны
- ЭКО. Традиционное оплодотворение
- Интрацитоплазматическая инъекция сперматозоидов (ИЦИС). Методика
- Оценка оплодотворения ооцита при ЭКО. Критерии
- Оценка состояния эмбриона при ЭКО. Критерии
- Культивирование эмбриона при ЭКО. Вспомогательное инкубирование