При легком течении болезни отмечаются лишь умеренное повышение температуры, озноб, миалгии, острый ринит. Летальных исходов не бывает. При тяжелом течении процесс быстро прогрессирует с нарастанием дихательной и сердечно-сосудистой недостаточности, гипоксией, азотемией, повышением уровня аминотрансфераз и щелочной фосфатазы, развитием метаболического и респираторного ацидоза, снижением содержания натрия в крови и альбуминов. В этих случаях возможно также развитие внутрисосудистой диссеминированной коагулоиатии с нарушением микроциркуляции, инфарктами в легких, с кровохарканьем, носовым, желудочным, кишечным или маточным кровотечением, гематурией, выраженной почечной недостаточностью, требующей перевода больных на гемодиализ. Причиной смерти в 50% случаев является инфекционно-токсический шок.

При благоприятном исходе болезни выздоровление начинается со 2-й нед, состояние больных улучшается, ремиттирующая лихорадка заканчивается постепенным лизисом. Однако длительно сохраняются слабость, головокружение, раздражительность, наблюдается ретроградная амнезия. Улучшение рентгенологической картины в легких начинается с 10-го дня болезни. Однако окончательное восстановление иногда затягивается до 8-10 нед.

При спорадической заболеваемости клиническая картина аналогична, но вариантов течения здесь гораздо больше: среди них выделяют острую пневмонию, острый альвеолит и острый бронхит. Легионеллез как нозокомиальная инфекция протекает обычно тяжело, особенно у тех больных, которым назначаются иммунодепрессанты.

Для выделения возбудителя обычно используют плевральную жидкость, реже - мокроту, кровь. Полученный материал можно непосредственно засевать на агар Мюллера - Хинтона с добавлением солей С02. Однако более надежно выделение возбудителя болезни при заражении материалом, полученным от больных морских свинок с последующим инфицированием куриных эмбрионов. Методом прямой иммунофлюоресценции удается обнаружить возбудителя в отпечатках из свежих или замороженных биоптатов бронхов или легких (полученных при бронхоскопии), мокроты, бронхиальных смывов. Для окраски возбудителя применяют кроличьи глобулины, меченные флюоресцирующим изотиоцианатом, соответственно 7 серогруппам возбудителя, т. е. используют антисыворотки к штаммам Philadelphia I-1-я серогруппа, Tohus-2-я серогруппа, Bloomington-3-я серогруппа, Los-Angclos - 4-я серогруппа, Cambridge - 5-я серогруппа, Oxford-6-я серогруппа, Chicago - 6-7-я серо-группы.

Отпечатки или каплю исследуемого материала на предметном стекле высушивают на воздухе и фиксируют в 10% растворе формалина 10 мин. Образцы осторожно промывают дистиллированной водой до полного устранения остатков формалина и высушивают на воздухе. На мазки наносят 1-2 капли меченого конъюгата и помещают на 20 мин в закрытую камеру для предотвращения испарения красителя. Препараты промывают фосфатным буфером (рН 7,6) 10 мин, дистиллированной водой, высушивают, покрывают глицериновой средой и просматривают в люминесцентном микроскопе. Клетки Legionella светятся ярким желто-зеленым свечением. Метод является высокоспецифичным, хорошо сочетается с методами гистопатологической окраски. Микроорганизм окрашивается в гистологических срезах методом импрегнации серебром по Хименесу, а также 1% толуидиновым голубым или 0,1% азуром 2.

Из серологических методов диагностики наиболее широкое применение получил метод непрямой иммунофлюоресценции. В качестве антигена используют выращенную на питательной среде и обработанную эфиром культуру возбудителя в 1% суспензии содержимого желточных мешков куриных эмбрионов (в работе применяют антигены 7 известных серогрупп L pneumophila). Каплю антигена наносят на предметное стекло, высушивают на воздухе 30 мин, погружают в ацетон на 15 мин и вновь высушивают. Препараты с антигеном обрабатывают сывороткой крови больных в разведениях от 1:32 до 1 : 128. Сыворотку разводят 10% свежеприготовленной суспензией содержимого желточных мешков куриных эмбрионов. Стекло инкубируют 30 мин при 37° С во влажной камере, промывают фосфатным буфером (рН 7,2), дистиллированной водой и высушивают на воздухе. Препараты обрабатывают меченной изотиоцианатом сывороткой против глобулинов человека, инкубируют 30 мин при 37°С, промывают фосфатным буфером (рН 7,2), дистиллированной водой, высушивают, покрывают глицериновой средой и просматривают в люминесцентном микроскопе. Титры антител определяют по интенсивности свечения образующегося иммунного комплекса по четырехбалльной шкале.

Другим серологическим методом является реакция микроагглютинации, которая позволяет обнаружить нарастание титров антител к 97,2% сывороток, полученных от больных болезнью легионеров. В качестве антигена в этой реакции используют культуру возбудителя, выращенного на питательной среде и убитого горячим паром при 100° С в течение 1 ч. Суспензия антигена в фосфатном буфере (рН 7,2) разводится фосфатным буфером (рН 6,4) до показателей оптической плотности 0,155-0,160, полученных на спектрофотометре при длине волны 420 нм. К рабочему разведению антигена добавляют сафранин до конечной концентрации 0,005%. Анализируемые сыворотки разводят фосфатным буфером (рН 7,2). Реакцию проводят на пластинах из полистирола с У-образными лунками диаметром 5 мм. К последовательным разведениям сыворотки в объеме 0,025 мл (от 1 :10 до 1 :128) в фосфатном буфере (рН 6,4) добавляют по 0,025 мл рабочего разведения антигена, окрашенного сафранином. Пластины со смесью сыворотки и антигена встряхивают в вибраторе 20 с, затем накрывают пустой пластиной для предохранения от высыхания и выдерживают при комнатной температуре 16 ч. По истечении указанного срока пластины помещают на 2 ч при температуре 4° С. Положительная реакция характеризуется образованием кольца агглютинированных клеток без осадка. При отрицательной реакции образуется осадок окрашенных клеток.

Увеличение титра антител в парных образцах сывороток, взятых в острой стадии болезни и в период реконвалесценции, служит серологическим критерием при диагностике легионеллеза. В тех случаях, когда анализ парных сывороток невозможен, в качестве точки отсчета положительной реакции принимают титр сыворотки 1 :80. Верхний предел титра сыворотки здоровых людей обычно не превышает 1 :20.

В стадии разработки находятся перспективные методы непрямой гемагглютинации и РЭМА (ELISA), радиоиммунный метод.

- Читать далее "Гепатит В. Возбудитель гепатита В"