Для определения оротовой кислоты:
- подозрение на дефицит орнитинтранскарбамилазы (ОТС) у гетерозигот,
- дефекты цикла мочевины,
- нарушение обмена пиримидинов,
- митохондриопатии,
- проведение аллопуринолового теста. Методы:
- высокоэффективная жидкостная хроматография — ВЭЖХ (HPLC),
- газовая хроматография - масс-спектрометрия. Материал: 5 мл мочи.
Положительный результат указывает на повышенное образование в митохондриях карбамилфосфата или нарушение метаболизма пиримидинов.

Для исследования метаболизма галактозы:
- подозрение на нарушения обмена галактозы — появление и прогрессиро-вание симптомов (рвота, диарея, желтуха, нарушение печеночных функций, сепсис ) у детей в 3-4-дневном возрасте после приема молока
Методы:
- энзиматический (определение галактозы),
- радиохимический (определение галактозы-1 -фосфата в эритроцитах),
- электрофорез,
- изоэлектрофокусирование,
- энзимодиагностика — исследование ферментов - GALT, галактокиназа, эиимыраза (в эритроцитах).

Материал: плазма (цельная кровь с 2 мл ЭДТА), плазму не замораживать (киназа мембраносвязанный энзим). Если возникает необходимость хранить при комнатной температуре.
Оценка значений: в норме уровень галактозы в плазме - менее 3 мг%, галактоза-1-фосфат - менее 3 мг%.

Исследования при подозрении на дефекты гликозилирования белков (carbohydrate-deficientglycoprotein) (CDG-синдромы), нарушения обмена гликопротеидов.
Методы:
- электрофорез с трансферрином,
- изоэлектрофокусирование,
- энзимодиагностика — определение в лейкоцитах или фибробластах ферментов гликозилирования (фосфоманномутаза, изомераза, гликозилтрансферраза, N-ацетилгликозаминилтрансфераза и др.).
Материал: 1 мл сыворотки крови.

Исследования при подозрении на мукополисахарадидозы и лизосомальные болезни накопления и олигосахаридозы (болезнь Помпе, GM,- и GM2-ганглиозидозы, а- и р-маннозидозы, фукозидоз, болезнь Гоше, сиалидоз, аспартатагликозаминоацидурия):
- селективные тесты на ГАГ,
- тонкослойная хроматография,
- определение различных типов гликозаминогликанов в моче (материал -10-20 мл мочи без консервантов) методом электрофореза,
- олигосахариды,
- свободная нейроаминовая кислота,
- энзимодиагностика (определение активности соответствующих ферментов в лейкоцитах или фибробластах).
Материал: 10-20 мл мочи (при пересылке - в замороженном состоянии или с добавлением 2-3 капель хлороформа).

Исследование метаболитов стероидогенеза:
- при подозрении на нарушение обмена стероидов (синдром Смита-Лемли-Опица и др.).
Методы: газовая хроматография с масс-спектрометрией.
Материал: 1 мл плазмы (пересылка возможна на сухом льду).

Исследование желчных кислот (при подозрении на дефекты обмена желчных кислот и пероксисомные заболевания):
Методы: тандемная масс-спектрометрия (FAB-MS/GC-MS).
Материал: 5 мл мочи, 2 мл плазмы или 2 мл желчи.

Биохимические методы применяются также для диагностики гетерозиготного носительства (болезнь Вильсона-Коновалова, недостаточность а-антирипсина, недостаточность глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы и др.).
Используются и другие методы: флюорометрический, спектрофотометрии, различные виды хроматографии, электрофореза и др.
В последние годы все большее признание находит высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) и хромато-масс-спектрометрия (ХМС).
Метод хромато-масс-спектрометрии сочетает в себе метод хроматографии и масс-спектрометрии (комбинированный метод). Он имеет большие преимущества перед другими методами, так как позволяет получить одновременно как количественную, так и качественную характеристику химического соединения, его молекулярную массу, наличие в исследуемой пробе и его количество. Кроме того, с помощью ХМС можно получить количественную информацию о неразделенных или совместно элюируемых химических веществах, что является одним из преимуществ этого метода.

Тандемная хромато-масс-спектрометрия - метод, с помощью которого можно определить более 3000 биохимических маркеров разных групп НБО одновременно, а также представить их молекулярную массу. При этом затраты времени на подготовку проб и проведение анализа гораздо меньше, чем при использовании других методов.

Существующие методы можно условно разделить на две подгруппы: 1) методы, позволяющие получить спектр какого-либо класса веществ (например, аминокислот, жирных кислот и др.), 2) методы, по определению концентрации конкретного вещества (например, флюорометрическое определение фенилала-нина в сухих пятнах крови). Существующие хроматографические методы позволяют решать обе задачи и определять не только спектр веществ, но и концентрацию каждого из них.

- Читать далее "Нарушения аминокислотного обмена. Программы диагностики нарушений аминокислотного обмена"