ЭКО. Традиционное оплодотворение

ЭКО — процедура, при которой у бесплодной пары берут яйцеклетки и сперму, смешивают их, что приводит к образованию зиготы в лабораторных условиях. Цель ЭКО — получение эмбрионов, а затем достижение беременности и рождение здорового ребенка. Сперматозоиды забирают с помощью методов, описанных выше.

Если есть достаточное количество сперматозоидов приемлемого качества, можно попытаться осуществить ЭКО с традиционной инсеминацией. Однако понятия «достаточное качество и количество» в действительности субъективны; в каждой лаборатории существуют собственные критерии, чтобы определить, когда для достижения оплодотворения паре следует использовать традиционную инсеминацию, а в каких случаях лучше подойдет интрацитоплазиматическая инъекция сперматозоида (ИЦИС).

Существуют многочисленные способы и комбинации методов обработки сперматозоидов. Первичная цель — удаление семенной жидкости и отделение подвижных сперматозоидов с нормальной морфологией и по возможности минимальным содержанием чужеродных клеточных примесей. Используют следующие процедуры: промывание спермы, разделение по градиенту плотности, метод «всплывания».

Независимо от метода обработки спермы рекомендуют поместить сперматозоиды приблизительно на 4 ч в культуральную среду с добавлением протеинов в инкубатор с углекислым газом для обеспечения жизнеспособности сперматозоидов.

традиционное оплодотворение

Жизнеспособность определяют как способность сперматозоидов связываться с вителлиновым слоем ооцита, проникать в вителлиновый слой и оволемму и в итоге оплодотворять яйцеклетку. Непосредственно перед оплодотворением образец спермы следует протестировать на концентрацию и подвижность сперматозоидов. Используя эти значения, можно рассчитать необходимый для оплодотворения объем среды, содержащей сперматозоиды в количестве, достаточном для оплодотворения.

Обычно ооциты оплодотворяют через 3-6 ч после забора, рассчитывая время инкубации с учетом их степени зрелости. Ооциты можно оплодотворять по отдельности или в группах. Группы ооцитов можно инкубировать и оплодотворять в чашках Петри или тестовых канюлях, содержащих сбалансированную среду с масляным покрытием или без него.

Отдельные яйцеклетки также можно оплодотворять в сосудах с 30-50 мкл капель сбалансированной культурной среды с масляным покрытием. Таким образом снижают требуемое для оплодотворения количество сперматозоидов. Итоговая концентрация подвижных сперматозоидов, используемая для традиционного оплодотворения, варьирует в разных лабораториях, в зависимости от клинической практики.
Слишком высокая концентрация может привести к увеличению доли случаев полиагурмии (когда более одного сперматозоида проникает в ооцит).

Слишком низкая концентрация может снизить показатели оплодотворений. Обычно концентрация варьирует от 50 000 до 100 000 подвижных сперматозоидов в 1 мл. Другие цифры отмечают при субоптимальных параметрах подвижности или морфологии.

- Рекомендуем далее ознакомиться со статьей "Интрацитоплазматическая инъекция сперматозоидов (ИЦИС). Методика"

Оглавление темы "Анализ спермы, ооцитов":
  1. Хирургический забор спермы. Микрохирургическая эпидидимальная аспирация спермы (MECA)
  2. Тестикулярный забор-аспирация спермы (ТЕСА). Микроскопический тестикулярный забор спермы (микроТЕСА)
  3. Консервация сперматозоидов. Обработка ооцитов при ЭКО
  4. Забор яйцеклетки при ЭКО. Оценка состояния ооцита
  5. Созревание ооцитов in vitro при ЭКО. Гормоны
  6. ЭКО. Традиционное оплодотворение
  7. Интрацитоплазматическая инъекция сперматозоидов (ИЦИС). Методика
  8. Оценка оплодотворения ооцита при ЭКО. Критерии
  9. Оценка состояния эмбриона при ЭКО. Критерии
  10. Культивирование эмбриона при ЭКО. Вспомогательное инкубирование

Ждем ваших вопросов и рекомендаций: