Эстеразы клеток. Параксоназа клеток
Эфиры карбоновых кислот и арилэфиры также гидролизуются в организмах животных и человека эстеразами. Альдридж классифицировал эстеразы как А и В. Эстераза А со значительно большей скоростью гидролизует n-нитрофенилацетат, чем эфир бутирата, и не ингибируется параоксоном. Эстераза В ингибируется параоксоном (10~7—10-8 моль/л) и гидролизует n-нитрофенилбутират быстрее, чем ацетат. Кроме того, эстераза А гидролизует параоксон до диэтилфосфорной кислоты и n-нитрофенола. На основании этих данных эстераза А называется арилэстеразой или параоксоназой (PON), а эстераза В-карбоксилэстеразой, метилбутиразой, монобутиразой.
Арилэстераза в большей степени локализована в органах и тканях животных и в меньшей — в плазме крови. Фермент, выделенный из плазмы крови овцы и очищенный в 385 раз, имеет молекулярную массу 35—50 кД. Для параоксона константа Михаэлиса эстеразы равна 4,2 ммоль/л (для сыворотки крови Кт = 0,2 ммоль/л). Очевидно, в процессе очистки разрушается фактор, активирующий в нативном состоянии фермент. Очищенный фермент ингибируется на 50 % 0,63 мМ раствором Ва2+ и 0,2 мМ раствором ЭДТА.
По активности различные формы арилэстеразы отличаются друг от друга в зависимости от величины рН, чувствительности к ионам и местом локализации. В растворимой, микросомной и митохондриальной фракциях гепатоцитов крыс общая ферментативная активность к параоксону составляла 71:34:7 при рН 8,8 и 22:49:8 при рН 7,7. В плазме крови человека и кролика обнаружены разновидности ферментов, катализирующих различные субстраты при строго определеных значениях рН.
Кроме параоксона, параоксоназа инактивирует такие ксенобиотики как фосфоорганические соединения, органофосфаты, карбаматы, эфиры уксусной кислоты. Эти соединения широко применяются в сельском хозяйстве и промышленности, используются в качестве лекарственных средств (антихолинэстеразные препараты — параоксон, армии), а некоторые из них являются боевыми отравляющими веществами (зарин, заман, табун).
Выделено три изофермента параоксоназы: PON1, PON2 и PON3. Наибольшее значение в метаболизме ксенобиотиков принадлежит PON1. В настоящее время известна аминокислотная последовательность и количество аминокислотных остатков (354), входящих в состав PON1. Молекулярная масса фермента составляет 39 кД. Идентифицирован ген, кодирующий PON1, находящийся в седьмой хромосоме человека, локусе 7q21.3. Локализуется фермент в основном в плазме крови и связан с липопротеинами высокой плотности.
В 90-е годы прошлого века были идентифицированы мутации, приводящие к генетическому полиморфизму PON1. Наиболее распространенной мутацией, обусловливающей изменение активности фермента, является замена в 192 положении глутамина на аргинин (Glnl92Arg), которая наследуется по аутосомному рецессивному типу.
находящийся в седьмой хромосоме человека, локусе 7q21.3. Локализуется фермент в основном в плазме крови и связан с липопротеинами высокой плотности.
- Читать далее "Активность PON1 в клетках. Карбоксилэстеразы"
Оглавление темы "Расщепление лекарств в клетках":1. Восстановление нитрозосоединений. Восстановление кетонов
2. Восстановление ароматических эпоксидов. Восстановительное дегалагенирование
3. Восстановление пиримидинов. Гидролиз в клетках
4. Эстеразы клеток. Параксоназа клеток
5. Активность PON1 в клетках. Карбоксилэстеразы
6. Холинэстераза клеток. Эпоксидгидролаза
7. Цитозольная эпоксидгидролазная активность. Амидазы клеток
8. Препараты метабализируемые амидазами. Гидролиз гликозидов и сульфатов
9. Флавоноиды. Ферментативное расщепление эфирсульфатов
10. Гидролиз лекарств. Расщепление лекарств ферментами