Ксенотрансплантация нейральных стволовых клеток. Получение нейральных стволовых клеток

После ксенотрансплантации нейральных стволовых клеток человека в мозг половозрелых крыс отмечается их активная миграция (Александрова и др., 2001). Известно, что процесс миграции и дифференцировки нейральных стволовых клеток контролируется набором специальных генов (Gershon et al., 1997; Корочкин, 2000).

Инициирующий миграционный сигнал клетке-предшественнику к началу дифференцировки дает белковый продукт протоонкогена c-ret совместно с GDNF. Следующий сигнал поступает от гена mash-1, который управляет выбором пути развития клетки. Кроме того, специфическая реакция дифференцирующихся клеток зависит также от а-рецептора цилиарного нейротрофического фактора (Gershon et al, 1997).

Таким образом, учитывая совершенно разную генетическую конституцию ксеногенных нейральных стволовых клеток человека и клеток мозга реципиента-крысы, следует признать не только видонеспецифичность нейротрофических факторов, но и высочайший эволюционный консерватизм генов, отвечающих за специфическую дифференцировку нейральных стволовых элементов.

Станет ли возможной ксенотрансплантация эмбрионального нейроматериала в нейрохирургической практике лечения нейродегенеративных патологических процессов, обусловленных нарушением синтеза миелина олигодендроцитами, покажет будущее. Пока же наиболее интенсивно решаются вопросы нейротрансплантации, связанные с получением из эмбрионального или зрелого мозга аллогенных нейральных стволовых клеток в культуре с последующей их направленной дифференцировкой в нейробласты или специализированные нейроны.

Нейральные стволовые клетки человека выделяют во время операций на субвентрикулярной области боковых желудочков и зубчатой извилине гиппокампа, клетки которых в культуре образуют нейросферы (нейральные шары), а после диспергирования и преформирования последних — все главные клеточные типы ЦНС или, в специальной среде, новые микросферы (Johansson et al., 1999; Кикекои et al., 1999).

нейральные стволовые клетки

В суспензионных культурах диссоциированной ткани, выделенной из перивентрикулярных отделов эмбрионального мозга, также возникают нейросферы (Gritti et al., 1996; Weiss et al, 1996; McKay, 1997; Carpenter et aL, 1999; Kukekov et al., 1999; Svendscn et al., 1999; Vescoui, Snyder, 1999; Bjorklund, Lindvall, 2000; Uchida, 2000).

Маркерами незрелых клеток головного мозга служат нестин, р-тубулин III (маркер нейрональной линии), виментин, GFAP и NCAM, для иммуноцитохимической идентификации которых используются моноклональные антитела. Нестин (белок промежуточных нейрофиламентов IV типа) экспрессируют мультипотентные нейроэктодермальные клетки.

Этот белок применяют для идентификации и выделения из ЦНС мультипотентных нейроэпителиальных клеток-предшественников с помощью моноклональных антител Rat-401, которые позволяют обнаружить до 95% клеток нервной трубки эмбрионов крысы на одиннадцатый день гестации. Нестин не экспрессируется на дифференцированных потомках нейральных стволовых клеток (Lendahl et al, 1990), однако присутствует в ранних нейральных клетках-предшественниках, постмитотических нейронах (Ray et al, 1993) и ранних нейробластах (Tohyama et al., 1992).

С помощью этого маркера идентифицированы нейроэпителиальные клетки-предшественники и доказано существование стволовых клеток в ЦНС. Виментин (белок промежуточных нейрофиламентов III типа) экспрессируется нервными и глиальными клетками-предшественниками, а также нейронами, фибробластами и гладкомышечными клетками. Следовательно, оба иммуноцитохимических маркера не обладают специфичностью, необходимой для раздельной идентификации нейральных стволовых и прогениторных клеток (Кикекои et al., 1999).

С помощью р-тубулина III устанавливают нейрональную направленность дифференцировки стволовых клеток, тогда как астроциты I типа идентифицируются по экспрессии GFAP, а олигодендроциты специфически экспрессируют галактсцереброзид (Ga!C) (Uchida et al., 1999).

- Вернуться в оглавление раздела "Патофизиология."

Оглавление темы "Нейральные стволовые клетки":
1. Дифференцировка прогениторных клеток. Стволовые свойства культурных клеток
2. Определение потенциала дифференцировки стволовых клеток. Системная трансплантация стволовых клеток
3. Доставка стволовых клеток в ткани. Генная инженерия клеток
4. Лечение рецессивных заболеваний. Преобразованные стволовые клетки
5. Коррекция генетического заболевания. Нейтральные стволовые клетки
6. Стволовой резерв нервной системы. Нейральные стволовые клетки эмбриона
7. Маркеры нейральных стволовых клеток. Дифференциация стволовых клеток нервной системы
8. Регенерация центральной нервной системы. Трансплантация нейральных стволовых клеток
9. Культура нейральных стволовых клеток. Приживление нейральных стволовых клеток у разных видов
10. Ксенотрансплантация нейральных стволовых клеток. Получение нейральных стволовых клеток

Ждем ваших вопросов и рекомендаций: