Хромосомный и генетический набор гибридных клеток. Плюрипотентность гибридных клеток

Поскольку уникальной особенностью генома цитогибридов является локализация родительских геномов в одном ядре, естественно, возникает вопрос о сохранении плюрипотентных свойств эмбрионального генома в ЭСК-соматических клеточных гибридах в условиях его тесного контакта с геномом дифференцированной клетки (Серов и др., 2001).

Морфологически цитогибриды ЭСК и соматических клеток имели сходство с родительской линией ЭСК. Оценка плюрипотентности показала, что все клоны с околодиплоидным набором хромосом были способны образовывать в суспензионных культурах эмбриоидные тельца, в которых присутствовали производные трех зародышевых листков (Matveeva et al., 1998).

Большинство гибридных клеток содержало антиген ЕСМА-7 — маркер, характерный для ранних эмбрионов мыши (Pascoe et al., 1992), а также обладало высокой активностью щелочной фосфатазы (Matveeva et al, 1998). Наиболее убедительные данные о высоких плюрипотентных свойствах гибридных клеток были получены в экспериментах по получению серии инъекционных химер с участием гибридных клеток клона HESS2 (Matveeva et al., 1998).

Анализ биохимических маркеров показал, что потомки донорских гибридных клеток находились в большинстве тканей химер. Следовательно, гибридные клетки, полученные путем слияния ЭСК и соматических дифференцированных клеток, сохраняют плюрипотентность на высоком уровне, включая способность формировать химеры при введении в полость бластоцисты (Серов и др., 2001).

гибридные клетки

Клоны HESS2 и HESS4 существенно различались по составу родительских хромосом, однако имели сходные плюрипотентные свойства. Можно было бы полагать, что плюрипотентность в гибридном геноме проявляет себя как признак доминантный, однако не исключено, что не все хромосомы эмбрионального генома вовлечены в процесс поддержания плюрипотентности.

Если такое допущение справедливо, то можно ожидать, что элиминация некоторых хромосом плюрипотентного партнера из генома гибридных клеток не будет сопровождаться изменением их плюрипотентного статуса. В этом случае анализ сегрегации родительских хромосом в эмбриональных гибридных клетках позволил бы вплотную приблизиться к идентификации хромосом, ответственных за контроль плюрипотентности эмбриональных клеток (Серов и др., 2001).

О. Серов и соавторы (2001) не обнаружили среди 50 потомков, полученных при скрещивании химер с нормальными мышами, таких, которые имели бы генотип мышей 129/01а и несли Х-хромосому мышей DD. Авторы видят причину этого в снижении плюрипотентности в гибридных клетках под влиянием соматического генома.

Альтернативным объяснением может быть негативное влияние трисомии по некоторым аутосомам и несбалансированность по половым хромосомам (XXY наблюдались в клетках до 15-го пассажа) в гибридных клетках при прохождении ими мейоза. Известно, что клетки XXY не в состоянии пройти мейоз и образовывать гаметы (Endo et al., 1991).

Трисомия способна также вызвать снижение пролиферативной активности гибридных клеток, в результате чего селективное преимущество в развитии химер может принадлежать клеткам реципиентного эмбриона (Hernandez, Fisher, 1999). Из этого следует, что для адекватной оценки плюрипотентного потенциала гибридных клеток необходимо получить гибридные клоны с нормальным диплоидным набором хромосом (Серов и др., 2001).

- Читать далее "Репрограммирование Х-хромосомы гибридных клеток. Плюрипотентность цитогибридов"

Оглавление темы "Дифференциация эмбриональных стволовых клеток":
1. Культивирование эмбриональных стволовых клеток. Участие стволовых клеток в эмбриогенезе
2. Генетически модифицированные стволовые клетки. Участие генов в дифференциации стволовых клеток
3. Гибридные клетки. Цитогибриды
4. Видовые эмбриональные гибридные клетки. Получение клонов гибридных клеток
5. Хромосомный и генетический набор гибридных клеток. Плюрипотентность гибридных клеток
6. Репрограммирование Х-хромосомы гибридных клеток. Плюрипотентность цитогибридов
7. Хромосомная память. Эффективная экспансия стволовых клеток в культуре
8. Спонтанная дифференцировка эмбриональных стволовых клеток. Дифференцировка стволовых клеток
9. Индуцированная дифференциация стволовых клеток. Направленная дифференциация стволовых клеток
10. Селективная дифференциация стволовых клеток. Регуляция дифференцировки стволовых клеток

Ждем ваших вопросов и рекомендаций: