Нейроэндокринную дифференцировку опухолевых клеток мы устанавливали при электронно-микроскопическом исследовании, гистохимически — с помощью реакции по Гримелиусу, иммуно-гистохимически — выявлением нейронспецифической энолазы и SlOO-протеина. Изучались как парафиновые, так и криостатные срезы, в которых иммуногистохимически выявлялись 9 клеточных онкогенов: fos, c-jun, c-myc, L-myc, ets-1, sis, src, met и res.

Результаты реакции оценивали полуколичественным методом [Коган Е. А., 1990] с проведением корреляционного анализа на персональном компьютере фирмы «Konron Electronic», использовали стандартный пакет обработки данных (программы «Stat» и «Class»).

Анализ экспрессии клеточных онкогенов в ходе опухолевой прогрессии проведен в два этапа. На первом изучалась экспрессия в группе мелкоклеточного рака с нейроэндокринной дифференцировкой (18 наблюдений). Установлено достоверное увеличение или тенденция к повышению экспрессии ядерных онкогенов с-тус и L-myc и уменьшение (достоверное или тенденция) экспрессии fos, jun, ets-1 и met в ходе опухолевой прогрессии.

На втором этапе при исследовании экспрессии клеточных онкогенов в доброкачественных и злокачественных нейроэндокринных опухолях были подтверждены выявленные ранее закономерности. В высокодифференцированных карциномах отмечалось резкое повышение экспрессии c-fos, c-sis и c-src, а в низкодифференцированных карциномах (мелкоклеточном раке) — снижение экспрессии c-fos и c-jun. Можно предположить, что усиление экспрессии c-fos и c-jun характерно для разных стадий опухолевой прогрессии и, вероятно, связано с особой функцией данных клеточных онкогенов.

Известно, что c-fos и c-jun являются немедленно реагирующими генами клеток, которые активируются под действием различных сигналов на ранних стадиях многих патологических процессов, вероятно, и при опухолевом росте.

Коэкспрессия клеточных онкогенов (парная) изучалась также в два этапа. В группе мелкоклеточного рака выявлена положительная корреляция (достоверная или близкая к достоверной) между экспрессией клеточных онкогенов fos—jun, fos — etsl, fos — sis, fos — src, jun — etsl, etsl-met, sis — src, jun — met и отрицательная — между экспрессией клеточных онкогенов jun — L-myc, c-myc — met, sis — met. При исследовании всей группы нейроэндокринных опухолей в целом получены аналогичные результаты.

Кроме того, положительная корреляция, близкая к достоверной, наблюдалась между экспрессией c-myc и L-myc, a достоверная отрицательная — между c-jun и c-sis, в то же время отрицательная корреляция c-myc — c-met оказалась недостоверной.

Корреляция экспрессии c-fos и c-jun отражает совместное функционирование соответствующих онкобелков, образующих гомо- и гетеродимерные комплексы (АР), которые регулируют транскрипцию различных генов. Что касается положительной корреляции c-fos — с-ets-l и c-jun — c-etsl, то она может быть связана с наличием в промоторе с-ets-l участка (сайта), связывающего гетеродимеры API и АР2 онкобелков c-fos и c-jun. Так, известно, что c-fos повышает активность промотора c-etsl [Oka Т. et al., 1991].

- Читать далее "Экспрессия и коэкспрессия онкобелков. Факторы роста и опухолевая прогрессия"