Клиника легионеллеза. Диагностика легионеллеза

При легком течении болезни отмечаются лишь умеренное повышение температуры, озноб, миалгии, острый ринит. Летальных исходов не бывает. При тяжелом течении процесс быстро прогрессирует с нарастанием дихательной и сердечно-сосудистой недостаточности, гипоксией, азотемией, повышением уровня аминотрансфераз и щелочной фосфатазы, развитием метаболического и респираторного ацидоза, снижением содержания натрия в крови и альбуминов. В этих случаях возможно также развитие внутрисосудистой диссеминированной коагулоиатии с нарушением микроциркуляции, инфарктами в легких, с кровохарканьем, носовым, желудочным, кишечным или маточным кровотечением, гематурией, выраженной почечной недостаточностью, требующей перевода больных на гемодиализ. Причиной смерти в 50% случаев является инфекционно-токсический шок.

При благоприятном исходе болезни выздоровление начинается со 2-й нед, состояние больных улучшается, ремиттирующая лихорадка заканчивается постепенным лизисом. Однако длительно сохраняются слабость, головокружение, раздражительность, наблюдается ретроградная амнезия. Улучшение рентгенологической картины в легких начинается с 10-го дня болезни. Однако окончательное восстановление иногда затягивается до 8-10 нед.

При спорадической заболеваемости клиническая картина аналогична, но вариантов течения здесь гораздо больше: среди них выделяют острую пневмонию, острый альвеолит и острый бронхит. Легионеллез как нозокомиальная инфекция протекает обычно тяжело, особенно у тех больных, которым назначаются иммунодепрессанты.

Для выделения возбудителя обычно используют плевральную жидкость, реже - мокроту, кровь. Полученный материал можно непосредственно засевать на агар Мюллера - Хинтона с добавлением солей С02. Однако более надежно выделение возбудителя болезни при заражении материалом, полученным от больных морских свинок с последующим инфицированием куриных эмбрионов. Методом прямой иммунофлюоресценции удается обнаружить возбудителя в отпечатках из свежих или замороженных биоптатов бронхов или легких (полученных при бронхоскопии), мокроты, бронхиальных смывов. Для окраски возбудителя применяют кроличьи глобулины, меченные флюоресцирующим изотиоцианатом, соответственно 7 серогруппам возбудителя, т. е. используют антисыворотки к штаммам Philadelphia I-1-я серогруппа, Tohus-2-я серогруппа, Bloomington-3-я серогруппа, Los-Angclos - 4-я серогруппа, Cambridge - 5-я серогруппа, Oxford-6-я серогруппа, Chicago - 6-7-я серо-группы.

легионеллез

Отпечатки или каплю исследуемого материала на предметном стекле высушивают на воздухе и фиксируют в 10% растворе формалина 10 мин. Образцы осторожно промывают дистиллированной водой до полного устранения остатков формалина и высушивают на воздухе. На мазки наносят 1-2 капли меченого конъюгата и помещают на 20 мин в закрытую камеру для предотвращения испарения красителя. Препараты промывают фосфатным буфером (рН 7,6) 10 мин, дистиллированной водой, высушивают, покрывают глицериновой средой и просматривают в люминесцентном микроскопе. Клетки Legionella светятся ярким желто-зеленым свечением. Метод является высокоспецифичным, хорошо сочетается с методами гистопатологической окраски. Микроорганизм окрашивается в гистологических срезах методом импрегнации серебром по Хименесу, а также 1% толуидиновым голубым или 0,1% азуром 2.

Из серологических методов диагностики наиболее широкое применение получил метод непрямой иммунофлюоресценции. В качестве антигена используют выращенную на питательной среде и обработанную эфиром культуру возбудителя в 1% суспензии содержимого желточных мешков куриных эмбрионов (в работе применяют антигены 7 известных серогрупп L pneumophila). Каплю антигена наносят на предметное стекло, высушивают на воздухе 30 мин, погружают в ацетон на 15 мин и вновь высушивают. Препараты с антигеном обрабатывают сывороткой крови больных в разведениях от 1:32 до 1 : 128. Сыворотку разводят 10% свежеприготовленной суспензией содержимого желточных мешков куриных эмбрионов. Стекло инкубируют 30 мин при 37° С во влажной камере, промывают фосфатным буфером (рН 7,2), дистиллированной водой и высушивают на воздухе. Препараты обрабатывают меченной изотиоцианатом сывороткой против глобулинов человека, инкубируют 30 мин при 37°С, промывают фосфатным буфером (рН 7,2), дистиллированной водой, высушивают, покрывают глицериновой средой и просматривают в люминесцентном микроскопе. Титры антител определяют по интенсивности свечения образующегося иммунного комплекса по четырехбалльной шкале.

Другим серологическим методом является реакция микроагглютинации, которая позволяет обнаружить нарастание титров антител к 97,2% сывороток, полученных от больных болезнью легионеров. В качестве антигена в этой реакции используют культуру возбудителя, выращенного на питательной среде и убитого горячим паром при 100° С в течение 1 ч. Суспензия антигена в фосфатном буфере (рН 7,2) разводится фосфатным буфером (рН 6,4) до показателей оптической плотности 0,155-0,160, полученных на спектрофотометре при длине волны 420 нм. К рабочему разведению антигена добавляют сафранин до конечной концентрации 0,005%. Анализируемые сыворотки разводят фосфатным буфером (рН 7,2). Реакцию проводят на пластинах из полистирола с У-образными лунками диаметром 5 мм. К последовательным разведениям сыворотки в объеме 0,025 мл (от 1 :10 до 1 :128) в фосфатном буфере (рН 6,4) добавляют по 0,025 мл рабочего разведения антигена, окрашенного сафранином. Пластины со смесью сыворотки и антигена встряхивают в вибраторе 20 с, затем накрывают пустой пластиной для предохранения от высыхания и выдерживают при комнатной температуре 16 ч. По истечении указанного срока пластины помещают на 2 ч при температуре 4° С. Положительная реакция характеризуется образованием кольца агглютинированных клеток без осадка. При отрицательной реакции образуется осадок окрашенных клеток.

Увеличение титра антител в парных образцах сывороток, взятых в острой стадии болезни и в период реконвалесценции, служит серологическим критерием при диагностике легионеллеза. В тех случаях, когда анализ парных сывороток невозможен, в качестве точки отсчета положительной реакции принимают титр сыворотки 1 :80. Верхний предел титра сыворотки здоровых людей обычно не превышает 1 :20.

В стадии разработки находятся перспективные методы непрямой гемагглютинации и РЭМА (ELISA), радиоиммунный метод.

- Читать далее "Гепатит В. Возбудитель гепатита В"

Оглавление темы "Эпидемиология стафилококковой инфекции. Гепатит В":
1. Восприимчивость к стафилококковой инфекции. Больничные и внебольничные очаги стафилококковой инфекции
2. Клиника стафилококковой инфекции. Диагностика стафилококковой инфекции
3. Профилактика стафилококковой инфекции. Легионеллез
4. Механизм передачи легионелл. Эпидемиологический процесс при легионеллезе
5. Клиника легионеллеза. Диагностика легионеллеза
6. Гепатит В. Возбудитель гепатита В
7. Источник гепатита В. Формы гепатита В
8. Восприимчивость к гепатиту В. Эпидемиология гепатита В
9. Диагностика гепатита В. Профилактика гепатита В
10. Меры борьбы с гепатитом В. Мероприятия по борьбе с гепатитом В

Ждем ваших вопросов и рекомендаций: